熒光定量PCR技術TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發熒光(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針。
熒光定量PCR技術定量的標準樣品:
(1)含有和待測樣品相同擴增片段的克隆質粒
(2)含有和待測樣品相同擴增片段的cDNA
(3)PCR的產物,可分別做系列稀釋。
服務流程:
步驟 | 客 戶 提 供 | 服 務 內 容 | 基 屹 提 供 |
1 | 新鮮的且盡量多的材料;已知的全長基因序列;盡可能詳細的背景資料:DNA/ RNA來源、豐度等。 | DNA/RNA提取,根據基因序列設計特異性的引物和熒光探針。 |
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2 | 純化好的DNA/RNA(大于5 ug/樣品);已知的全長基因序列;盡可能詳細的背景資料:DNA/ RNA來源、豐度等。 | 根據基因序列設計特異性的引物和熒光探針。 |
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3 |
| 以DNA為模板,對目的基因進行熒光定量PCR檢測分析 | 提供完整的定量分析結果、實驗熒光定量擴增曲線及詳細的實驗步驟。 |
注意:客戶可根據所能提供的起始材料不同,選擇從步驟1或2啟動項目。