相關文章
            您現在的位置:首頁 > 產品展示 > 細胞生物學技術服務 > 慢病毒包裝 > Lentiviral 慢病毒制備

            Lentiviral 慢病毒制備

            簡要描述:慢病毒是逆轉錄病毒的一種,具有逆轉錄病毒的基本結構和特性:整合入宿主細胞基因組,長期表達,可用于轉基因動物制備;但也有不同于逆轉錄病毒的組份和特性:比逆轉錄病毒具有更高的滴度,不僅可以感染分裂期細胞,更重要的,還能感染非分裂期的細胞。利用慢病毒載體,可以研究啟動子的調控、過表達特定基因或沉默特定基因。

            • 產品型號:
            • 廠商性質:生產廠家
            • 更新時間:2024-05-13
            • 訪  問  量:1967

            慢病毒包裝服務

            慢病毒簡介

                慢病毒是逆轉錄病毒的一種,具有逆轉錄病毒的基本結構和特性:整合入宿主細胞基因組,長期表達,可用于轉基因動物制備;但也有不同于逆轉錄病毒的組份和特性:比逆轉錄病毒具有更高的滴度,不僅可以感染分裂期細胞,更重要的,還能感染非分裂期的細胞。利用慢病毒載體,可以研究啟動子的調控、過表達特定基因或沉默特定基因。

            慢病毒包裝技術特點

            病毒表達系統

            腺病毒表達系統

            慢病毒表達系統

            病毒基因組

            雙鏈DNA病毒

            RNA逆轉錄病毒

            自主復制

            不能

            不能

            是否整合

            病毒基因組游離于宿主基因組外,瞬時表達外源基因

            病毒基因組整合于宿主基因組,長時間、穩定表達外源基因

            感染細胞類型

            感染絕大多數細胞,包括分裂期、非分裂期細胞。

            感染絕大多數細胞,包括分裂期、非分裂期細胞。

            表達豐度

            高水平表達

            中水平表達

            表達時間

            快(1-2 天)

            慢(2-4 天)

            滴度

            滴度可達10E12pfu/mL

            滴度可達10E9-10E10TU/mL

            克隆容量

            可插入高達8kb的外源片段,滴度隨插入片段長度增加而降低

            可插入不超過8kb的外源片段,滴度隨插入片段長度增加而降低

            免疫原性

            高免疫原性

            低免疫原性

            RNAi

            病毒進入細胞往往引起細胞內干擾素反應,一般情況下不適合做RNAi實驗

            適合,是RNAi實驗的優選工具

            基因過表達

            包裝容量較大,可以滿足較大基因的包裝,是過表達基因的優選工具

            包裝容量有限,過表達的基因過大時,病毒滴度受到影響

            過表達microRNA

            適合

            適合,是過表達microRNA實驗的優選工具

            下調microRNA

            有報道但不成熟

            有報道但不成熟

            是否可以自行擴增

            可以

            需要特殊包裝系統和包裝環境

            A. 慢病毒載體的構建:

            根據不同的研究需求構建慢病毒載體,如用于RNAi的慢病毒載體、用于基因過表達的慢病毒載體、用于啟動子活性研究的慢病毒載體等;

            B. 慢病毒包裝過程:

                將重組病毒質粒及其輔助包裝質粒共轉染至包裝細胞中,收集富含慢病毒顆粒的細胞上清液,對其濃縮后得到高滴度的慢病毒濃縮液,在293T細胞中測定并標定病毒滴度。

            C. 慢病毒包裝結果:

            滴定濃度:1×107~1×108TU/ml

            zui終體積:1 ml純化后的病毒液(儲存于PBS)

            儲存:批量儲存的*條件為-80°C。

            慢病毒包裝用途:

            慢病毒載體包裝之后成為假病毒顆粒后,可用于:

            · 感染原代細胞;

            · 制備穩定表達/沉默特定基因的單克隆細胞株;

            · in vivo的基因操作;

            · 轉基因動物,特別是轉基因大鼠的制備。

            留言框

            • 產品:

            • 您的單位:

            • 您的姓名:

            • 聯系電話:

            • 常用郵箱:

            • 省份:

            • 詳細地址:

            • 補充說明:

            • 驗證碼:

              請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7